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液相色譜梯度洗脫的原理和配置特點(diǎn)

點(diǎn)擊次數(shù):6713 發(fā)布時(shí)間:2018-11-22
  梯度洗脫是指在同一個(gè)分析周期中隨著時(shí)間的變化按一定程序梯度性地改變洗脫液的比例(濃度配比、成分、離子度、溶液性等)或pH,以期將層析柱上不同的組分洗脫出來的方法。從而可以使一個(gè)復(fù)雜樣品中性質(zhì)(性)差異較大的組分能按各自適宜的容量因 子k達(dá)到良好的分離目的。梯度洗脫一般分為二元壓梯度,二元低壓梯度和四元低壓梯度;二元壓梯度需要兩臺壓泵,二元低壓梯度和四元低壓梯度都是只需要一臺壓泵和一個(gè)比列閥。

  梯度洗脫的原理如下:
  具體地講,當(dāng)樣品隨梯度起點(diǎn)的流動相進(jìn)入色譜柱入口時(shí),由于起點(diǎn)流動相中弱洗脫溶劑A含量較,洗脫溶劑B含量較低,化合物C1(保留性適中)和化合物C2(保留較)因分配系數(shù)(k值)較而滯留于色譜柱入口附近,幾乎未移動。一段時(shí)間后,B增加到一定數(shù)值,C1的k值達(dá)到足夠小(比如小于10),其在柱中的移動速率明顯增大,并且隨著B的增加,其移動速率愈加快速,直到tC1時(shí)流出色譜柱,被檢測器檢測到并被記錄成色譜峰C1,tC1雖然比等度時(shí)的保留時(shí)間長多,但C1的的平均k值卻小,因而色譜峰并未展寬,靈敏度仍處于較水平。B持續(xù)增加,在隨后的某個(gè)時(shí)間點(diǎn),C2的k值也降到10以下,C2的移動速率也開始變快,以與C1類似的方式于tC2被洗脫出色譜柱,其平均k值同樣小,色譜峰亦未展寬,靈敏度處于較水平。
流動相的梯度變化即流動相性、PH值等的梯度變化,即洗脫能力成梯度變化。

  梯度洗脫配置相對復(fù)雜,配置特點(diǎn):
  1. 二元壓梯度洗脫需要配置兩臺壓泵,一個(gè)混合器及連接管理,配置較,成本;
  2. 二元低壓梯度洗脫需要配置一臺壓泵、一個(gè)二元比例閥、一臺在線脫氣機(jī)、一個(gè)混合器(脫氣機(jī)和混合器視情況而定,可不選)及連接管路,配置較低,成本較低;
  3. 四元低壓梯度洗脫需要配置一臺壓泵、一個(gè)四元比例閥、一臺在線脫氣機(jī)、一個(gè)混合器(視情況而定,可不選)及連接管路,配置較,成本較低。



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